1.1 實(shí)驗(yàn)材料:
馬尾藻( 經(jīng)超臨界CO2 萃取預(yù)處理) 山東
1.2 儀器:
電子天平BS210S 北京塞多利斯儀器系統(tǒng)有限公司
超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)JY98- Ⅲ 上海新芝生物技術(shù)研究所
可見(jiàn)分光光度計(jì)722S 上海精密科學(xué)儀器有限公司
超濾設(shè)備Millipore冷凍干燥機(jī)Alpha 1- 2 Martin,Christ Germany
1.3 實(shí)驗(yàn)方法
1.3.1 多糖測(cè)定苯酚- 硫酸法[5]
1.3.2 馬尾藻多糖提取流程
稱取10 g 馬尾藻, 加適量蒸餾水, 超聲波細(xì)胞破碎, 熱水浸提, 離心取上清液, 加三氯乙酸沉淀蛋白, 離心取上清液, 濃縮, 加無(wú)水乙醇**體積分?jǐn)?shù)為75 %, 離心取沉淀, 冷凍干燥得粗多糖。
1.3.3 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分析[4]
1.3.4 超濾
取熱水浸提并脫蛋白后的清液, 用50 K 超濾膜過(guò)濾, 分成分子量大于5 萬(wàn)Da 的部分( A) 和分子量小于5 萬(wàn)Da 的部分, 將分子量小于5 萬(wàn)Da 的部分用3 K 超濾膜過(guò)濾, 分成分子量介于5 萬(wàn)Da 和3 000Da的部分( B) 和分子量小于3 000Da 的部分( C) , C 為小分子物質(zhì), 棄去。A 和B 分別經(jīng)乙醇沉淀、凍干, 測(cè)定多糖得率。
