離心機(jī)是全球幾乎每個生物醫(yī)學(xué)研究實驗室都使用的儀器。
離心分離是通過離心分離復(fù)雜混合物成分的過程。
通過以極高的速度旋轉(zhuǎn)實驗室樣品，給定混合物的成分將受到離心力，這將導(dǎo)致更稠密的顆粒從旋轉(zhuǎn)軸移開，而較輕的顆粒向旋轉(zhuǎn)軸移動。這些顆?？梢栽诠艿牡撞砍恋沓伤^的沉淀，然后可以進(jìn)一步處理或分析該分離的樣本或剩余的溶液（上清液）。
離心機(jī)的主要組成部分是轉(zhuǎn)子，轉(zhuǎn)子是高速旋轉(zhuǎn)的運動部件。
轉(zhuǎn)子可以固定在適當(dāng)?shù)奈恢?，或者離心機(jī)可以使用固定在稱為主軸的零件頂部的多個轉(zhuǎn)子。
通常，離心機(jī)轉(zhuǎn)子的蓋子會擰緊，以防止樣品飛出。
許多離心機(jī)將具有制冷單元，該制冷單元允許在旋轉(zhuǎn)過程中控制內(nèi)部溫度。
它們還具有用于輸入每次運行參數(shù)的旋鈕或按鈕，這些參數(shù)可以包括旋轉(zhuǎn)的持續(xù)時間，溫度以及旋轉(zhuǎn)的大?。ㄒ运俣然蛳鄬αΡ硎荆?/p>
旋轉(zhuǎn)速度以RPM或每分鐘轉(zhuǎn)數(shù)來衡量。RPM是一個棘手的值，因為不是導(dǎo)致顆粒從混合物中分離出來的離心機(jī)的速度，而是作用在這些顆粒上的力。
作用在粒子上的力與離心機(jī)轉(zhuǎn)子的半徑有關(guān)，并且由于不同的離心機(jī)具有不同的轉(zhuǎn)子尺寸，因此可以以相同的速度或RPM施加不同的力。
離心強(qiáng)度也可以量化為相對離心力或RCF。RCF通常表示為地球重力加速度的倍數(shù)。
RCF表示為轉(zhuǎn)子半徑和角速度平方除以地球重力加速度的乘積。
RCF可以通過以下公式與RPM相關(guān)聯(lián)，其中r代表以厘米為單位的離心機(jī)半徑。
使用此方程式可以表示失敗或成功實驗之間的差異，但是您不必對每個新過程都應(yīng)用此計算。離心機(jī)通常帶有列線圖，可以很容易地將RCF轉(zhuǎn)換為RPM。使用直尺連接離心機(jī)的半徑和給定的RPM值，以獲得RCF。
要開始旋轉(zhuǎn)樣品，請考慮溫度。如果使用冷藏離心機(jī)，則需要在開始旋轉(zhuǎn)之前使機(jī)器內(nèi)部溫度達(dá)到所需的溫度，或者您可以找到其他方法來冷卻轉(zhuǎn)子。
即將旋轉(zhuǎn)之前，請確保已擰緊并固定了所有試管上的蓋子。
裝入試管時，請確保每個樣品都與另一個樣品直接平衡。
如果只有一根管子，那么再做一根可以作為配重的管子。
如果您有三支試管，可以將它們排列成三角形，以使它們彼此等距。
平衡離心機(jī)的重量至關(guān)重要。離心機(jī)轉(zhuǎn)子達(dá)到高速并具有大量動能。如果平衡不當(dāng)，則會將整個離心機(jī)從其靜止位置推進(jìn)，并造成嚴(yán)重?fù)p壞。
一旦確認(rèn)轉(zhuǎn)子和蓋子牢固，就啟動離心機(jī)并四處徘徊，直到達(dá)到所需的速度。如果您發(fā)現(xiàn)問題電話，并且經(jīng)驗豐富的實驗室成員會來幫助您。
離心完成后，您應(yīng)該能夠在離心管底部看到沉淀的生物樣本，該沉淀與溶液的其余部分或上清液分離。
可以通過倒出上清液（將其倒出的奇特名稱或?qū)⑵湮觯﹣砣コ锨逡骸?/p>
然后可以通過稱為重懸的過程將純化后的樣本返回溶液。重復(fù)離心或旋轉(zhuǎn)細(xì)胞，然后吸出細(xì)胞，然后重懸在緩沖液中，通常稱為洗滌細(xì)胞。
既然您已經(jīng)了解了離心的一些基礎(chǔ)知識，現(xiàn)在該來看看那里的某些類型的離心機(jī)以及可以執(zhí)行的離心程序。
定角轉(zhuǎn)子離心機(jī)可能是您在實驗室中會遇到的zui常見的儀器類型。許多臺式離心機(jī)都屬于此類。
這些離心機(jī)中的試管位于固定的傾斜位置，用于差分離心方案中。在這些協(xié)議中，可以使用一系列不同速度的離心來純化生物樣品，例如動物細(xì)胞。通常，這些協(xié)議涉及幾個細(xì)胞洗滌步驟。
與定角轉(zhuǎn)子相比，回轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)子具有可彎曲的管架，可讓樣品向外旋轉(zhuǎn)。這些轉(zhuǎn)子在密度梯度離心等應(yīng)用中很有用，在該應(yīng)用中，生物樣品會遷移到梯度介質(zhì)的不同層。這種類型的離心分離可用于快速將一種細(xì)胞類型與另一種細(xì)胞類型分離，或用于分離單個細(xì)胞器。
zui后，超速離心機(jī)是您在實驗室中發(fā)現(xiàn)的所有離心機(jī)的老大哥。它可以超過70,000 rpm的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)，非常適合分離DNA或病毒等小顆粒。
由于該離心機(jī)的高速運行，因此應(yīng)格外小心，以確保適當(dāng)平衡負(fù)載，并確保轉(zhuǎn)子和蓋子均牢固。
